Məhsullar

Sinxron mutasiyaların təsirlərinin fermentativ aktivliyi dəyişmək üçün birləşdiyi üsul asanlıqla proqnozlaşdırıla bilməz, çünki bu təsirlər həmişə xətti şəkildə əlavə olmur.Beləliklə, substratı bağlayan amin turşusu qalıqlarının eyni vaxtda mutasiyalarının təsirinin səciyyələndirilməsi fermentlərin substrat spesifikliyinin başa düşülməsinə mühüm töhfə verə bilər.Spodoptera frugiperda (Sfbetagly) beta-qlikozidazasında hər iki qalıq Q39 və E451 substratla qarşılıqlı əlaqədə olur və bu, substratın spesifikliyini müəyyən etmək üçün vacibdir.Sfbetagly'nin ikiqat mutantları (A451E39, S451E39 və S451N39) sahəyə yönəldilmiş mutagenez yolu ilə hazırlanmış, bakteriyalarda ifadə edilmiş və yaxınlıq xromatoqrafiyasından istifadə etməklə təmizlənmişdir.Bu fermentlər substrat kimi p-nitrofenil beta-qalaktozid və p-nitrofenil beta-fukoziddən istifadə etməklə xarakterizə edilmişdir.Q39 və E451 mövqelərində sahəyə yönəlmiş mutasiyaları ehtiva edən Sfbetagly-nin tək və ikiqat mutantları üçün k cat/Km nisbəti ikiqat mutasiyaların (Gdouble) ESdouble xəncərinin (ferment keçid vəziyyəti kompleksinin) sərbəst enerjisinə təsirini nümayiş etdirmək üçün istifadə edilmişdir. daggerxy) tək mutasiyalar (Gdouble daggerx və Gdouble xəncər) nəticəsində yaranan təsirlərin cəmi deyil.Gdouble xəncərindəki bu fərq tək mutasiyaların təsirlərinin qismən üst-üstə düşdüyünü göstərir.Beləliklə, bu ümumi təsir Gdouble daggerxy-də yalnız bir dəfə sayılır.Beta-qlikozidazalara dair kristalloqrafik məlumatlar Q39 və E451 qalıqlarını və substratın eyni hidroksil qrupunu əhatə edən iki dişli hidrogen bağının mövcudluğunu aşkar edir.Buna görə də, həm termodinamik, həm də kristalloqrafik məlumatlar göstərir ki, Q39 və E451 qalıqları onların substratla müvafiq qarşılıqlı təsirinə qarşılıqlı təsir göstərir.