Məhsullar

Kolisin E1 kanal domeninin membran topologiyası flüoresan rezonans enerji ötürülməsi (FRET) ilə tədqiq edilmişdir.FRET donor kimi genetik olaraq kodlanmış flüoresan amin turşusunu (kumarin) və FRET qəbuledicisi kimi DABMI (4-(dimetilamino)fenylazofenil-4'-maleimid) ilə bağlanmış selektiv olaraq etiketlənmiş sistein qalığını əhatə edirdi.Floresan kumarin qalığı ortoqonal tRNA/aminoasil-tRNA sintetaza cütü vasitəsilə zülala daxil edildi ki, bu da kolisin kanalı domenində hər hansı bir yerə selektiv daxil olmağa imkan verdi.Hər bir variantda kumarin birləşməsi üçün stop (TAG) mutasiyası və DABMI əlavəsi üçün sistein (TGT) mutasiyası var idi.Həm həll olunan, həm də membrana bağlı vəziyyətlər üçün FRET analizindən istifadə etməklə 1-6 spiral daxilində altı spirallərarası məsafə müəyyən edilmişdir.FRET məlumatları, kanal domeninin membrana bağlı strukturuna yeni bir fikir verən membran birləşməsindən sonra 3-6 spirallar arasında interhelikal məsafələrdə böyük dəyişiklikləri göstərdi.Ümumiyyətlə, kumarin-DABMI FRET interhelical effektivliyi kolisin kanalı üçün çətir modelinə əsaslanaraq, membrana bağlandıqdan sonra azaldı.Cari və əvvəllər dərc olunmuş FRET məlumatlarına əsasən kanal domeninin qapalı vəziyyəti üçün ilkin model hazırlanmışdır.Model 1-7-ci spiralların hüceyrədənkənar tərəfdən saat əqrəbi istiqamətində dairəvi düzülməsini və spiral 8 və 9-un yaratdığı mərkəzi transmembran saç sancağı ətrafında 1, 6, 7 və 10-cu spiralların membran interfasial birləşməsini təklif edir.