Məhsullar

Digər müsbət zəncirli RNT virusları kimi, tombusviruslar da membrana bağlı viral replikaza kompleksi (VRC) tərəfindən təkrarlanır.VRC p92 virus kodlu RNT-asılı RNT polimerazadan (RdRp), viral p33 RNT şaperonundan və bir neçə birgə seçilmiş host zülalından ibarətdir.Tərcümə edildikdən sonra funksional RdRp olmaq üçün p92 replikasiya zülalı VRC-yə daxil edilməli, ardınca onun aktivləşdirilməsi lazımdır.Biz əvvəllər hüceyrəsiz maya ekstraktı əsaslı analizdə göstərmişdik ki, Pomidor kollu stunt virusu (TBSV) RdRp-nin aktivləşdirilməsi həll olunan host faktor(lar)ı tələb edir.Bu yazıda biz hüceyrə istilik şoku zülalını 70 (Hsp70) N-terminal olaraq kəsilmiş rekombinant TBSV RdRp-nin aktivləşdirilməsi üçün tələb olunan birgə seçilmiş host faktoru kimi müəyyən edirik.Bundan əlavə, Hsp70 funksiyasının kiçik molekul əsaslı bloklanması in vitroda tombusvirus RdRp tərəfindən RNT sintezini maneə törədir.Bundan əlavə, neytral fosfolipidlərin, yəni fosfatidiletanolamin (PE) və fosfatidilkolinin (PC) RdRp aktivasiyasını in vitro gücləndirdiyini göstəririk.Bunun əksinə olaraq, fosfatidilqliserol (PG) in vitro RdRp aktivləşdirilməsinə güclü və dominant inhibitor təsir göstərir.Biz həmçinin nümayiş etdiririk ki, PE və PC RdRp-viral plus-zəncirli RNT [(+) RNT] qarşılıqlı təsirini stimullaşdırır, PG isə viral RNT-nin RdRp-yə bağlanmasını maneə törədir.Tombusvirus RdRp aktivləşməsində müxtəlif fosfolipidlərin stimullaşdırıcı və inhibitor rollarına əsaslanaraq, biz təklif edirik ki, hədəflənmiş subhüceyrə membranlarının lipid tərkibi tombusviruslar tərəfindən infeksiya zamanı yeni VRC birləşməsini tənzimləmək üçün istifadə edilə bilər. Virus kodlu RNT-dən asılı RNT polimeraza Bir neçə müsbət zəncirli RNT virusunun yoluxmuş hüceyrələrində viral RNT nəslinin sintezindən məsul olan (RdRp) başlanğıcda qeyri-aktivdir.Bu strategiya, çox güman ki, sitozolda viral RNT sintezinin qarşısını alacaq və bu, RNT ilə tetiklenen hüceyrə antiviral reaksiyalarının sürətlə induksiyasına səbəb olacaqdır.Membranla əlaqəli replikaza kompleksinin yığılması zamanı viral RdRp, RdRp-ni RNT sintezi qabiliyyətinə malik edən tam başa düşülməmiş bir proses vasitəsilə aktivləşir.TBSV RdRp-dən istifadə etməklə biz birlikdə seçilmiş hüceyrə Hsp70 şaperonu və neytral fosfolipidlərin RdRp-nin in vitro aktivləşdirilməsini asanlaşdırdığını göstəririk.Bunun əksinə olaraq, fosfatidilqliserol (PG) in vitro RdRp aktivasiyasına və RdRp-viral RNT qarşılıqlı təsirinə dominant inhibitor təsir göstərir ki, bu da RdRp-ni əhatə edən membranöz mikrodomenin onun RNT sintezi qabiliyyətinə böyük təsir göstərdiyini göstərir.Beləliklə, virus RdRp-nin aktivləşməsi çox güman ki, yoluxmuş hüceyrələrdə çoxlu host komponentlərindən asılıdır.