Məhsullar

LecA (PA-IL) Pseudomonas aeruginosa tərəfindən istehsal olunan sitotoksik lektin və adezindir və yüksək spesifiklik və yaxınlıq ilə hidrofobik qalaktozidləri bağlayır.Bir lecA-egfp tərcümə füzyonundan və biofilmin hüceyrədənkənar matrisinin immunoblot analizindən istifadə edərək, lecA-nın biofilmdə böyüyən hüceyrələrdə ifadə olunduğunu göstəririk.Həm polistirol, həm də paslanmayan polad üzərində statik biofilm analizlərində biofilmin dərinliyi və səth örtüyü lecA-nın mutasiyası ilə azaldılmış və LecA-nı həddən artıq istehsal edən PAO-P47 ştamında gücləndirilmişdir.Polad kuponlardakı lecA mutantının deyil, PAO-P47 ana ştammı tərəfindən biofilmin səthinin örtülməsi də izopropil-beta-D-tioqalaktozid (IPTG) və ya p-nitrofenil-alfa-D-qalaktosidin (IPTG) iştirakı ilə böyümə ilə maneə törədilib. NPG).Bundan əlavə, bu hidrofobik qalaktozidlər olmadıqda əmələ gələn yetkin vəhşi tipli biofilmlər IPTG-nin əlavə edilməsi ilə dağıla bilər.Bunun əksinə olaraq, P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lektilərinə yüksək yaxınlığa malik olan p-nitrofenil-alfa-L-fukozanın (NPF) əlavə edilməsi biofilmin əmələ gəlməsinə və ya yayılmasına təsir göstərməmişdir.P. aeruginosa PAO1-in planktonik böyüməsinə IPTG, NPG və ya NPF-nin mövcudluğu təsir etməmişdir, nə də ştam bu şəkərləri karbon mənbələri kimi istifadə edə bilməmişdir ki, bu da biofilmin əmələ gəlməsinə müşahidə edilən təsirlərin LecA-liqandın rəqabətli inhibəsi ilə bağlı olduğunu göstərir. bağlayıcı.Oxşar nəticələr polad kuponlar üzərində dinamik axın şəraitində yetişdirilən biofilmlər üçün də əldə edilmişdir ki, bu da LecA-nın müxtəlif ətraf mühit şəraitində P. aeruginosa biofilm arxitekturasına töhfə verdiyini göstərir.

Arabidopsis bitkilərinin yarpaqlarında ksiloglukan oliqosakaridlərinin yan zəncirindən t-fukosil qalığını buraxa bilən alfa-L-fukosidaza (EC 3.2.1.51) aşkar edilmişdir.Bundan əlavə, oxşar substrat spesifikliyinə malik bir alfa-L-fukosidaza, SDS-PAGE-də tək bir zolaq yaratmaq üçün kələm (Brassica oleracea) yarpaqlarından təmizləndi.Bu zülal zolağından iki peptid ardıcıllığı əldə edildi və onlar AtFXG1 adlandırmağı təklif etdiyimiz alfa-fukosidaza üçün kodlaşdıran bir Arabidopsis genini müəyyən etmək üçün istifadə edildi.Bundan əlavə, məlum alfa-L-fukosidazalarla homologiyaya malik bir Arabidopsis geni də tapılmışdır və biz onu AtFUC1 adlandırmağı təklif etmişik.Həm AtFXG1, həm də ATFUC1 Heteroloji olaraq Pichia pastoris hüceyrələrində və mədəniyyət mühitində ifraz olunan alfa-L-fukosidaz aktivliklərində ifadə edildi.AtFXG1 tərəfindən kodlanan alfa-L-fukosidaza ksiloglukan XXFG-dən olan oliqosakaridlərə, eləcə də 2'-fukosil-laktitola qarşı aktiv idi, lakin p-nitrofenil-alfa-L-fukopiranosidə qarşı deyil.Bununla belə, heteroloji olaraq ifadə edilən AtFUC1 yalnız 2'-fukosil-laktitola qarşı aktiv idi.Beləliklə, birincisi ksiloglukan mübadiləsi ilə əlaqəli olmalıdır.