Məhsullar

Qraves orbitopatiyasının (GO) irəliləməsində orbital fibroblastların yetkin adipositlərə differensasiyası və sonradan piy toxumasının yığılması göstərilmişdir.Otofagiya adipogenezdə iştirak edir, lakin GO-nun başlanmasında və inkişafında otofagiyanın rolu haqqında çox az şey məlumdur.Bu tədqiqatın məqsədi GO patogenezində autofagiyanın rolunu araşdırmaqdır. GO olan xəstələrdən və normal subyektlərdən olan orbital piy/birləşdirici toxuma eksplantları, həmçinin təcrid olunmuş orbital fibroblastlar təhlil edilmişdir.Adipogenez, hidrogen peroksidli və ya olmayan diferensiallaşdırıcı mühitdən istifadə edərək induksiya edildi və otofagiya bafilomisin A1 və Atg5 hədəflənmiş qısa saç ipi RNT (shRNA) istifadə edərək manipulyasiya edildi.Avtofaqosomlar elektron mikroskopiya ilə müəyyən edilmişdir.Otofagiya ilə əlaqəli genlərin və adipogenezlə əlaqəli transkripsiya faktorlarının ifadəsi real vaxtda əks transkripsiya-polimeraza zəncirvari reaksiya və/və ya Western blot analizi ilə təhlil edilmişdir.Lipid damcılarının yığılması Yağ Qırmızı O ilə boyanma yolu ilə araşdırıldı. Otofagik vakuollar GO hüceyrələrində qeyri-GO hüceyrələrə nisbətən daha çox idi (p<0.05).Otofagiya ilə əlaqəli genlərin ifadəsi GO toxumalarında və hüceyrələrində müvafiq olaraq GO olmayan həmkarlarına nisbətən əhəmiyyətli dərəcədə yüksək olmuşdur.İnterleykin-1β GO hüceyrələrində LC3-II, p62 və Atg7 zülalını artırdı.Otofaqosom yığılması adipogenezin 4-cü günündə göstərildi və lipid damlacıqlarının əmələ gəlməsi ilə birlikdə 10-cu gündə azaldı.LC3 və p62 zülallarının ifadəsi diferensiasiyadan sonra 48 saat ərzində artdı və 4-cü gündən 10-cu günə qədər tədricən azaldı. Bafilomisin A1 ilə müalicə və Atg5-in shRNA tərəfindən yıxılması lipid damlacıqlarının yığılmasına mane oldu və adipogen markerlərin ifadəsini basdırdı. GO ilə müqayisədə toxuma və hüceyrələrdə autofagiya artdı. Qeyri-GO toxuma və hüceyrələr, autofagiyanın GO patogenezində rol oynadığını göstərir.Otofagiya manipulyasiyası GO üçün terapevtik hədəf ola bilər.