Məhsullar

X-gal (həmçinin 5-bromo-4-xloro-3-indolil-β-D-qalaktopiranosid üçün BCIG qısaldılmışdır) əvəz edilmiş indolla əlaqəli qalaktozadan ibarət üzvi birləşmədir.Mürəkkəb 1964-cü ildə Jerome Horwitz və əməkdaşları tərəfindən sintez edilmişdir. Rəsmi kimyəvi ad tez-tez daha az dəqiq, lakin bromoxloroindoksil qalaktozid kimi daha az çətin ifadələrə qısaldılır.İndoksildən olan X X-gal büzülməsində X-in mənbəyi ola bilər.X-gal tez-tez molekulyar biologiyada bir fermentin, β-qalaktosidazanın, adi hədəfi olan β-qalaktozidin varlığını yoxlamaq üçün istifadə olunur.Histokimya və bakteriologiyada bu fermentin fəaliyyətini aşkar etmək üçün də istifadə olunur.X-gal, ferment katalizli hidroliz nəticəsində indiqo boyasına bənzər həll olunmayan mavi birləşmələr verən bir çox indoksil qlikozid və efirlərdən biridir.

X-gal laktoza analoqudur və buna görə də D-laktozada β-qlikozid bağını parçalayan β-qalaktosidaza fermenti tərəfindən hidrolizə oluna bilər.X-gal, β-qalaktosidaza ilə parçalandıqda, qalaktoza və 5-bromo-4-xloro-3-hidroksiindol verir - 1. Sonuncu sonra kortəbii olaraq dimerləşir və 5,5'-dibromo-4,4'-dikloroya oksidləşir. -indigo - 2, həll olunmayan sıx mavi məhsul.X-gal özü rəngsizdir, buna görə də mavi rəngli məhsulun olması aktiv β-qalaktosidazanın mövcudluğu üçün bir test kimi istifadə edilə bilər.Bu, həmçinin bakterial β-qalaktosidazanın (lacZ adlanır) müxtəlif tətbiqlərdə reportyor kimi istifadəsinə imkan verir.

İki hibrid analizdə β-qalaktosidaza bir-biri ilə qarşılıqlı əlaqədə olan zülalları müəyyən etmək üçün müxbir kimi istifadə edilə bilər.Bu üsulda, genom kitabxanaları maya və ya bakterial sistemdən istifadə edərək zülallarla qarşılıqlı əlaqə üçün yoxlanıla bilər.Yoxlanılan zülallar arasında uğurlu qarşılıqlı əlaqə olduqda, bu, aktivləşdirmə sahəsinin promotorla bağlanmasına səbəb olacaqdır.Promotor lacZ geni ilə bağlıdırsa, X-galın iştirakı ilə mavi-piqmentli koloniyaların əmələ gəlməsi ilə nəticələnən β-qalaktosidazanın istehsalı, buna görə də zülallar arasında uğurlu qarşılıqlı əlaqəni göstərəcəkdir.Bu texnika ölçüsü 106-dan kiçik olan kitabxanaların skrininqi ilə məhdudlaşa bilər. X-galın uğurlu parçalanması da indolun uçuculaşması səbəbindən nəzərəçarpacaq dərəcədə pis qoxu yaradır.

X-gal özü rəngsiz olduğundan, mavi rəngli məhsulun olması aktiv β-qalaktosidazanın mövcudluğu üçün test kimi istifadə edilə bilər.

Aktiv fermentin bu asan identifikasiyası βqalaktosidaza (lacZ geni) genindən müxtəlif tətbiqlərdə reportyor gen kimi istifadə etməyə imkan verir.